_1_ NMP has enabled a significant prolongation of preservation times throughout all organ types with 24 h in kidney (113), 1 week in liver (114), 3 days in lung (115), 24 h in heart (116) EVMP.
_16_ 16_ Печень 65-летнего пациента массой 2200 г была получена путем донорства после сердечно-сосудистой смерти после внебольничной остановки сердца. Печень была отклонена для трансплантации в соответствии с критериями приемлемости донорской смерти … После холодовой ишемии продолжительностью 315 минут печень подключали к перфузионному аппарату Liver Assist (Organ Assist, Гронинген, Нидерланды), который мы модифицировали, добавив диализную мембрану (Prismaflex, Baxter, Иллинойс) и оксигенаторы длительного действия ( Quadrox-iD Pediatric, Macquet, Getinge Group, Раштатт, Германия). Нутритивная поддержка включала инфузии таурохолевой кислоты (7,7 мг/ч), метилпреднизолона (50 мг/24 ч), парентеральное питание, инсулин и глюкагон. Это первое разделение печени, выполненное во время нормотермической перфузии ex vivo, чтобы продемонстрировать длительную жизнеспособность (>6 дней) и непрерывную перфузию обоих трансплантатов. Этот метод не только предоставляет потенциальную модель для сравнения терапии и регенерации, но также дает возможность провести тестирование жизнеспособности каждого трансплантата. Современные методы оценки жизнеспособности трансплантата ex vivo остаются несовершенными, и в настоящее время единственным надежным способом подтверждения жизнеспособности трансплантата является клиническая трансплантация. Будущие исследования должны быть сосредоточены на выявлении новых методов оценки жизнеспособности ex vivo и понимании того, почему эти трансплантаты стали нежизнеспособными через 120 часов.
_18_ Печень человека, отклоненную для трансплантации, перфузировали с использованием перфузата на основе эритроцитов в нормотермических условиях (36 °C), а затем разделяли и одновременно перфузировали на отдельных аппаратах. Десять человеческих печени были разделены, в результате чего осталось 20 частей печени. Медиана жизнеспособности ex situ составила 125 часов, а медиана выживаемости ex situ — 165 часов. Долгосрочная выживаемость была продемонстрирована клиренсом лактата, выработкой желчи, выработкой фактора-V и накоплением аденозинтрифосфата. … Технология нормотермической машинной перфузии имеет ряд преимуществ перед традиционными методами консервации органов перед трансплантацией 1 . Перфузия донорской печени человека перед трансплантацией может продлить время сохранения ex situ в краткосрочной перспективе и одновременно позволить некоторую оценку жизнеспособности органа как предиктора функции трансплантата после трансплантации 2,3 . На сегодняшний день основной целью этой технологии является повышение полезности маргинальных органов с использованием кратковременной перфузии в диапазоне нескольких часов. Однако перфузия в диапазоне от нескольких дней до недель может облегчить более сложную оценку этих органов с возможностью восстановления или модификации до трансплантации 4,5 . Это может не только увеличить количество доступных органов для трансплантации, но и улучшить качество трансплантатов, используемых в настоящее время.
Длительная перфузия печени человека ex situ с использованием нормотермических условий также представляет собой уникальную возможность для изучения ex situ живых тканей человека. Разделив целую печень человека во время нормотермической машинной перфузии, как мы уже описывали ранее 9 , 10 , 11 , эту технологию можно применить к двум частям печени. Это могло бы создать моделируемую среду для тестирования терапевтических средств с соответствующим контролем и изучения повреждений и регенерации печени.
В этом исследовании мы стремились разработать модель, подтверждающую концепцию долгосрочной нормотермической перфузии ex situ разделенной печени человека, чтобы расширить границы перфузии ex situ за счет увеличения выживаемости за пределы 7 дней и одновременной перфузии двух частичных органов. Таким образом, мы стремились разработать модель для исследования долгосрочной перфузии печени с потенциальным применением в трансляционных исследованиях и за их пределами. … (причины выживания) Поток печеночной артерии был значительно выше для тех печени, которые выжили >7 дней как до, так и после разделения (медиана 615 мл/мин [IQR 530–674 мл/мин] против 342 мл/мин [IQR 308–405 мл/мин], p = 0,002, непосредственно перед расщеплением) (рис. 4J ). Эта разница была очевидна при использовании целевых показателей контроля давления, которые были модифицированы только для удовлетворения требований к минимальному расходу. После поправки на вес каждой печени эта разница все еще присутствовала, но менее выражена (дополнительный рисунок 4 ). Потоки в воротной вене были значительно выше в печени, которая выжила >7 дней между 1 и 3 днями после разделения (медиана 1,030 мл/мин [МКР 0,320–1,310 мл/мин] против 0,280 мл/мин [МКР 0,220–0,970 мл/мин] , p = 0,049, через 1 день после расщепления) (рис. 4Л ). …. При использовании печени, которую нельзя было использовать в нашем центре для трансплантации, сохранение ex situ достигалось на срок более 7 дней и максимум до 13 дней. ….. Кроме того, это было достигнуто за счет модификации коммерчески доступной системы перфузии печени легкодоступными компонентами (оксигенаторы длительного действия, газовый смеситель, диализный фильтр). Преимущество этого подхода заключается в том, что он легко воспроизводим и доступен для других центров, заинтересованных в долгосрочной перфузии целой или частичной печени, и открывает путь для глобального сотрудничества и бесчисленных возможностей в качестве модели для трансляционных исследований. … сгруппировав в этом исследовании печень, выжившую >7 дней и ≤7 дней, мы смогли определить предикторы долгосрочной выживаемости с использованием биохимии печени, маркеров синтетической функции печени, гемодинамики печени и гистопатологии. Органы, выжившие >7 дней, имели значительно более высокие показатели выработки желчи, более высокие уровни фактора-V, более высокий кровоток в печеночной артерии и меньший уровень микровезикулярного стеатоза. Эти изменения были заметны в течение первых 48–72 часов перфузии и представляли собой потенциальные цели для определения признаков долгосрочной выживаемости. Это не только имеет значение для оценки внутреннего качества органов, но и эта характеристика может быть переоценена в режиме реального времени и поможет нам в реанимации и восстановлении этой печени в долгосрочной перспективе. …. Наконец, понимание того, почему все эти органы в конечном итоге выходят из строя, является областью постоянных исследований нашей группы. Что касается органной недостаточности, мы наблюдали характерную картину, включающую быстрое повышение уровня лактата, увеличение сопротивления печеночных сосудов с низким артериальным и портовенозным кровотоком в печени, рефрактерный перфузатный ацидоз и нереагирующую гипогликемию. Органная недостаточность может быть вторичной по причине отсутствия ключевого метаболического компонента, необходимого для поддержания энергетического гомеостаза, или ухудшения качества перфузата с течением времени, поскольку продукты крови не пополнялись и не обновлялись 17 . Эта модель также остается нефизиологической без оси кишечник-печень или автоматизированных циркадных вариаций 18 . Эти причины могут объяснить, почему у большинства пациентов печень неизбежно начинает отказывать после 5–7 дней перфузии. С другой стороны, может отсутствовать стимул фактора роста, который сигнализирует гепатоцитам о необходимости регенерации 1 . Будущая работа должна быть направлена на то, чтобы понять, почему эти органы выходят из строя, раскрыть потенциал сохранения этих органов на несколько недель или месяцев и предоставить больше времени для значимого вмешательства и регенерации.
_ 000 Здесь мы показываем, что почки человека, отброшенные для трансплантации, могут сохраняться в метаболически активном состоянии до 4 дней при перфузии бесклеточным перфузатом с добавлением промежуточных продуктов цикла ТСА при субнормотермии (25 ° C). Используя пространственно-разрешенное отслеживание изотопов, мы демонстрируем сохраненные метаболические потоки в микроокружении почек до 4-го дня перфузии. После 4-го дня наблюдались значительные изменения в популяциях почечных клеток за счет пространственной липидомики и увеличения маркеров повреждения, таких как ЛДГ, NGAL и окисленные липиды. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38740760/
Литература длительность НМП